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逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术同时检测水中多种肠道病毒

论文类型 基础研究 发表日期 2007-02-01
来源 环境科学研究
作者 张崇淼,刘永军,王晓昌,薛小平
关键词 肠道病毒 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR) 通用引物 同时检测
摘要 建立了一种利用通用引物RT- PCR 技术检测水中肠道病毒的方法.利用脊髓灰质炎病毒1~3 型,柯萨奇病毒B3型作为参考病毒株,根据肠道病毒RNA5′非编码区中具有高度同源性的序列来设计通用引物. 比较了M- MLV 酶和AMV 酶的逆转录效果,AMV 酶能够成功地从地表水和生活污水中逆转录病毒RNA ,更适于实际应用. 对比研究了PCR 过程中的退火温度,c (Mg2 + ) 等因素对RT- PCR 检测结果的影响,选择退火温度55 ℃, c (Mg2 + ) 为2mmolPL的反应条件,优化了RT -

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